Плотность крови у крыс с экспериментальным инфарктом миокарда.

Известно,  что  в  процессе  развития  инфаркта  мио-карда  изменяются  физико-химические  свойства  крови  и  её  состав.  Из  зоны  некроза  в  кровь  выходят  ферменты,  белки,  пептиды  и  другие  вещества,  в  результате  чего  происходит  изменение  её  вязкости,  осмолярности.

Целью  настоящего  исследования  явилось  изучение  плотности  крови  у  животных  в  процессе  развития  экспериментального  инфаркта  миокарда  и  сравнение  изучаемого  показателя  с  данными  ферментативного  анализа  активности  КФК.

Эксперименты  проведены на  110  белых  беспородных  крысах  массой  140  -  180  г.  Плотность  крови  определяли  пробирочным  методом  путём  помещения капли  крови  (кровь  брали  из  хвостовой  вены)  в  растворы  хлористого  натрия  следующих  концентраций:  8,6,  8,8,  9,0,  9,2,  9,4,  9,6,  9,8,  и  10,0%.  Активность  КФК  определяли  стандартными  наборами  фирмы  "Boehringer  Mannyeim"  (ФРГ).  Экспериментальный  инфаркт  миокарда  воспроизводили  путём  лигирования  нисходящей  ветви  левой  коронарной  артерии.  Контролем  служили  интактные  и  ложнооперированные  животные.  Наличие  инфаркта  миокарда  подтверждалось  морфологическими  методами. (по  тексту  с  нитросиним  тетразолием  через  3  часа  и  более  после  перевязки  коронарной  артерии).

Установлено,  что  капля  крови  интактных  животных  во  всех  случаях  не  тонула,  оставаясь  на  поверхности  раствора  хлористого  натрия  концентрации  9,0%  и  выше.  Капля  крови,  взятая  у  ложнооперированных  крыс  как  через  3  часа,  так  и  через  8  часов  после  операции,  оставалась  на  поверхности  раствора  концентрации  9,2%  и  выше  в  100%  случаев.  Для  животных,  у  которых  морфологически  было  подтверждено  наличие  инфаркта  миокарда,  изучаемый  показатель  составлял  9,6%  и  выше  независимо  от  периода  наблюдения.

Полученные  результаты  свидетельствуют,  что  плот-ность  крови  у  животных  с  экспериментальным  инфарк-том  миокарда  достоверно  выше,  чем  у  животных  конт-рольных  групп,  следовательно,  изучаемый  показатель  может  быть  критерием  наличия  инфаркта  миокарда.

Незначительное  повышение  плотности  крови  у  ложнооперированных  животных,  вероятно,  происходит  в  результате  частичного  повреждения  миокарда,  так  как  у  них  производился  прокол  миокарда  без  дальнейшего  нанесения  лигатуры.

 {Метод  регистрации  изменений  плотности  крови  апробирован  также  на  60  крысах,  у  которых  наложение  лигатуры  на  коронарную  артерию  сопровождалось  формированием  очага  некроза,  10  крысах  с  наложением  лигатуры  без  последующей  перевязки  (ложнооперированные  животные)  и  10  интактных  крысах.

Размер  очага  некроза  у  животных  через  1  час  после  коронароокклюзии  составлял  32,6 + 2,1%,  через  6  часов  -    43,5 + 2,2%  и  через  18  часов  -  47,0% + 1,8%  от  массы  левого  желудочка.  У  всех  животных,  составляющих  эту  группу  (крысы  с  развившимся  ИМ),  капля  крови  погружалась  в  9,4%  раствора  NaCl.  У  интактных  и  ложно-оперированных  крыс  капля  крови  оставалась  на  поверхности  раствора.}

Изучение  активности  КФК  в  сыворотке  крови  тех  же  крыс  не  только  показало  меньшую  ценность  ферментативной  диагностики  и  ранний  период  инфаркта  миокарда  (см. Табл. ),  но  и  позволило  предположить,  что  плотность  крови  увеличивается,  вероятно,  не  за  счёт  появления в  крови  значительного  количества  ферментов,  выходящих  из  зоны  некроза.   Идентификация  инфаркта  миокарда  по  активности  ферментов  возможна  в  сроки  6  ч  и  более,  в  то  же  время  как  повышение  плотности  крови  у  животных  с  инфарктом  миокарда  отмечалось  уже  через  3  ч  после  операции.  Одним  из  механизмов  повышения  вязкости  крови  при  инфаркте  миокарда  является  потеря  воды,  которая  уходит  в  клетки,  следовательно  кровь  теряет  одну  из  самых  низких  по  плотности  своих  частей,  что,  естественно,  может  привести  к  увеличению  её  удельной  плотности.  Повышение  осмолярности  крови  при  инфаркте  миокарда,  происходящее  за  счёт  появления  грубодисперсных белков,  также  может  быть  одним  из  возможных  механизмов  изучаемого  нами  явления.  Данные литературы  о  повышении  сонолюминесценции  плазмы  крови  при  инфаркте  миокарда  свидетельствуют,  что  в  кровь  из  зоны  некроза  попадают  вещества,  которые,  возможно, также  могут  повлиять  на  плотность крови.

Необходимо дальнейшее  изучение  причин  повышения  плотности  крови  при  инфаркте  миокарда,  однако  уже  сейчас  целесообразно  оценить  диагностическую  значимость  предлагаемого  метода  в  клинике.  Доступность  и  техническая  простота  дают   возможность  использования  его  на  догоспитальном  этапе.

 Таблица 

Изменение  показателя  плотности крови  у  крыс

в  различные  сроки  от  начала  развития

экспериментального  инфаркта  миокарда.

  Диагностическое значение  изменения плотности крови у больных инфарктом миокарда  в острый период.

При  инфаркте  миокарда  (ИМ)  отмечаются  значительные  изменения  в  составе  компонентов  плазмы  крови.  При  ИМ  на  фоне  активного  накопления  цито-плазматических  продуктов  в  кровь  больных  усиленно  поступают  фрагменты  клеточных  оболочек  и  внутри-клеточных  структур,  возрастает  содержание  средних  молекул,  ферментов,  миоглобина,  повышается  осмолярность  крови,  её  вязкость,  увеличивается  масса  эритроцитов.  Все  описанные  изменения,  происходящие  при  развитии  ИМ,  могут  приводить  к  сдвигам  физико-химических  характеристик  крови  и  возможному  изменению  её  плотности.

Одним  из  перспективных  направлений  в  диагностике  острого  ИМ  является  регистрация  повышения  содержания  миоглобина  в  крови  и  моче  заболевших.  Однако  повышение  уровня  миоглобина  отмечается  и  при  манипуляциях,  связанных  с  нарушением  целостности  мышечной  ткани  (внутримышечные  инъекции,  венесекция  и  др.),  зависит  от  сопутствующей  патологии  и  не  информативно  в  течение  1го  часа  заболевания.  Определение ферментов  (КФК,  МВ-КФК  и  др.)  представляет  диагностическую  ценность  лишь  через  6 - 12 ч.  Информативность  однократного  электрокардиографического  исследования  составляет  51 - 65 %,  повторного - 83 %, что  может  быть  связано  с  локализацией  очага  некроза,  нарушением  ритма  и  проводимости,  первично  "искаженной"  ЭКГ.  Радиологические  методы  требуют  дорогой  аппаратуры  и  значительных  затрат  времени  на  исследование.

Таким  образом,  в  связи  с  несовершенством  существующих  методов  актуальность  разработки  новых  диагностических  критериев  ИМ  не  вызывает  сомнений.

Плотность крови определяли описанным пробирочным методом, помещая каплю крови  в растворы хлорида натрия с концентрацией : 9,0;9,2;9,4;9,6; 9,8; 10,0 % ( 6 разведений ) , всем больным проводилось экг обследование, а также биохимическое обследование ( определяли активность  КФК,  МВ- КФК, ЛДГ1, АСТ и  АЛТ стандартными наборами.( принцип регистрации изменения плотности крови  путём помещения исследуемых образцов  в растворы с заданной концентрацией, в частности при острой кровопотери известен давно и описан в литературе  - Барашков Г. А \\ Вестн. хир.- 1956. -№ 3- с. 48 – 53.).

ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЛОТНОСТИ КРОВИ.

Обследованы 10 здоровых ( 1-я группа), 80 больных И М ( 2-Я ГРУППА), 20  с нестабильной стенокардией ( 3-я группа), 10  больных стенокардией напряжения ( 4-я группа ), 30 – с постинфарктным кардиосклерозом и недостаточностью кровообращения 2 и 3 степени ( 5-ая группа ), 10 с аритмиями различного происхождения на фоне  ИБС ( 6-я группа), а также 10 больных с нарушениями ритма другой этиологии ( 7 – я группа ). 

Результаты  и  обсуждение:

Капля  крови  больных  1,  4,  6,  и  7й  групп  ни  в  одном  случае  не  тонула  в  растворе  с  концентрацией  хлорида  натрия  9,0 %,  в  3й  группе  только  у  1  больного  через  40  мин  после  ангинозного  приступа  капля  крови  погружалась  в  раствор  такой  концентрации.  Из  20  больных  с  постинфарктным  кардиосклерозом,  обследованных  в  течение  1го  часа  после  начала  ангинозного  приступа,  у  5  капля  тонула  в  растворе  концентрации  9,0 %  и  у  2  больных  при  концентрации  9,2 %,  оставаясь  на  поверхности  при  всех  других  концентрациях.  У  10  больных  из  этой  группы,  обследованных  в  более  поздний  период,  капля  не  тонула  в  растворе  с  концентрацией  9,0 %  во  всех  случаях  (см. Табл.).

Капля  крови  2  из  24  больных,  обследованных  в  1й  час  после  ангинозного  приступа,  не  тонула  в  растворе  концентрации  9,0 %.  В  этот  период  на  ЭКГ  никаких изменений,  свидетельствующих  о  наличии  очага  поражения,  не  обнаружено.  Однако  в  дальнейшем  на  основании  изменений  ЭКГ  и  уровня  ферментов  в  крови  был  поставлен  окончательный  диагноз  ИМ,  Плотность  крови  больных  в  этот  период  не  измеряли.  У  остальных  22  больных  диагностирован  ИМ:  6 - мелкоочаговый и у 16 - крупноочаговый,  трансмуральный.

                                                                                                Таблица 

Частота  погружения  капли  крови в

растворе  хлорида  натрия

Как  видно  из  таблицы,  у  больных  с  крупноочаговым  и  трансмуральным  ИМ  капля  крови  не  погружалось  в  растворе,  начиная  с  концентрации  9,65   и  выше,  что  указывает  на  более  высокую  плотность  крови  больных  этой  группы.  У  одного  больного  с  мелкоочаговой  ИМ  капля  крови  не  тонула,  начиная  с  концентрации  9,2 %,  у  другого  9,4 %;  в  остальных  4  случаях  капля  крови  тонула  в  растворе  при  концентрации  9,4 %.  Информативность  электрокардиологического  исследования,  проведённого  у  описанных  выше  больных,  составляла  немногим  больше 50 %,  а  ферментативная  диагностика  не  способствовала  определению  очага  поражения  ни  в  одном  случае.

Обследование  больных,  которым  в  конечном  итоге  был  поставлен  диагноз  ИМ  в  сроки  от  1  до  6  часов  после  ангинозного  приступа,  показало  практически  такую  же картину  изменения  плотности  крови,  что  и  у  больных,  обследованных  в  течение  первого  часа.  Электрокардиологическое  исследование  в  этот  период  было  информативно  в 80 %  случаев,  а  ферментная  диагностика  -  в  50 %.

В  более  поздний  период  показатели  плотности  крови  у  больных  ИМ  несколько  понижались,  оставаясь  более  высокими, чем  в  других  группах.  У  больным  с рецидивирующим  ИМ  на  7 - 10  день  заболевания  плотность  крови  вновь  достигала  пика.  В  максимальной  концентрации  (10,0 %)  раствора  хлорида  натрия  капля  крови  тонула  у  6  больных.  В  дальнейшем 5  из  них  умерли  не  позднее,  чем  через  7 дней.

Обнаруженное  нами  повышение  плотности  крови  у  некоторых  больных  с  постинфарктным  кардиосклерозом,  обследованных  в  ранние  сроки  после  подозрения  на  повторный  ИМ,  вероятно,  связано  с  некротизированием  небольших  участков  миокарда  без  дальнейшего  расширения  их  границ,  что  коррелирует  с  литературными  данными  о  повторных  пиках  КФК  при  ИМ,  не  сопровождающемся  распространением  зоны  некроза.

Как  видно  из  представленных  данных,  плотность  крови  повышается  в  случае,  когда  в  миокарде  происходят  грубые,  необратимые  изменения,  причём  степень  повышения  плотности  зависит  от  величины  очага  поражения  (плотность  крови  у  больных  с мелкоочаговым  ИМ  меньше,  чем  у  больных  с  крупноочаговым  и  трансмуральным  ИМ)  и  тяжести  течения  (5  больных  из  6  с  самыми  высокими  показателями  плотности  крови  умерли).  Однако  повышение  плотности  крови  не  зависит  от  локализации  очага  некроза.

В  настоящее  время  трудно  объяснить  механизмы  повышения  плотности  крови  при  ИМ  известными  в  литературе  данными.  При  ИМ  перераспределяется  жидкость,  которая  устремляется  в  клетки,  в  результате  чего  повышается  вязкость  крови.  Потеря  воды  как  наиболее  лёгкой  составляющей,  вероятно,  может  приводить  к  увеличению  удельной  плотности  крови,  однако  сообщение,  что  вязкость  крови  может  повышаться  и  при других формах ИБС,  опровергает  ведущую  роль  этого  механизма  (так как значимого повышения плотности крови  у больных без  ИМ  не  отмечалось).  Возможность  повышения  плотности  крови  при  ИМ  за  счёт  выхода  из  зоны  невроза  ферментов,  миоглобина  также  не  подтверждается,  поскольку  пики  этих  повышений  приходятся  на  разные  промежутки  времени.  Повышение  осмолярности,  отмечаемое  при  ИМ  и  происходящее  за  счёт  выхода  из  зоны  некроза  в  кровь  белков  (возможно,  за  счёт  появления  этих  белков  и  происходит  повышение  плотности  крови),  требует  дальнейшего  изучения,  так  как  нет  сведений  об  изменении  осмолярности  при  заболеваниях,  с  которыми  проводится  дифференциальная  диагностика.  Таким  образом,  вопрос  о  причинах  повышения  плотности  крови  при  ИМ  нуждается  в  дальнейшем  изучении  в  эксперименте  и  в  клинике.На высокую корреляцию между изменениями физических свойств крови  и характером электрокардиографической кривой указывают исследования сотрудников НИИ скорой помощи (Голиков и соавт.).Однако причины объясняющие наличие корреляции предлагаются в форме гипотезы.

Несмотря  не  отсутствие  объяснения  механизмов  столь  ранних  и  значительных  колебаний  плотности  крови  при  ИМ,  диагностическая  значимость  изменения  показателя  плотности  крови  при  данном  заболевании  очевидна.  Обращают  на  себя  внимание  высокая  достоверность  различий  плотности  крови  у  больных  ИМ и  в  других  группах  обследованных,  а  следовательно,  и  высокая  информативность  его изучения  для  диагностики  ИМ.  Метод  характеризуют  доступность,  техническая  простота,  отсутствие  необходимости  использования  дорогостоящих  реактивов  и   оборудования,  что  даёт  ему  преимущество  перед  другими  методами  диагностики.

Таким  образом,  можно  предположить,  что  регистрация  изменений  плотности  крови  позволяет  заподозрить  ИМ  в  самые  ранние  сроки  его  развития  (уже  на  догоспитальном  этапе)  при  неинформированности  других  диагностических  критериев  в  этот  период.